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ELISA試劑盒檢測細胞因子知多少
發(fā)布時間： 2018-04-20 點擊次數： 1902次從21世紀初期，ELISA試劑盒由于免疫學研究中一個非常活躍的領域就是細胞因子的研究，它的檢測成為現代生物科學研究的重要方面。國內的生物廠家，運用抗原、抗體反應的原理已研制出了高靈敏度（sensitive）、高特異性、高度配套的細胞因子檢測試劑盒，生產的檢測試劑盒涵蓋幾乎所有的細胞因子。依據檢測方法不同，可分為ELISA測定（酶聯(lián)免疫）和放射免疫測定。
1. 放射免疫測定
放射免疫測定是將同位素分析的高靈敏度與抗原抗體反應的特異性相結合，方法大多采用競爭法原理。待檢的細胞因子與放射性同位素標記的細胞因子競爭與細胞因子抗體（多克隆抗體或單克隆抗體）結合，再通過分離劑分離結合狀態(tài)的標記物，計數后根據標準曲線即可計算出細胞因子的量。本法具有靈敏度高（可檢測出ng甚至pg水平），特異性強、準確性好等特點。
2.ELISA測定
2-1.
酶聯(lián)免疫斑點（ELISPOT） 檢測試劑盒是基于定量夾心ELISA法原理，將刺激后的細胞滴加到包被在貼PVDF微孔中，放置于37℃孵育。在孵育的過程中，細胞分泌的細胞因子即會被包被的抗體所捕獲，以下的過程與一般的ELISA實驗相同，zui后用不溶性的酶聯(lián)底物進行顯色，每一個顯色點（斑點）既代表一個分泌細胞因子的細胞。通過的ELISPOT分析儀或在顯微鏡下進行計數，就可以進行分析。ELISPOT法用于檢測單個細胞分泌的細胞因子，綜合了普通ELISA方法的高特異性和準確定量的優(yōu)點，而且具有生物活性分析得出與功能相關的結果的優(yōu)點。
2-2.
ELISA試劑盒雙抗夾心ELISA法 雙抗體夾心法需制備針對細胞因子不同位點的兩個單克隆抗體，一個抗體作為固相抗體用于包被，另一個作為標記抗體。可采用常規(guī)雙抗夾心法，也可采用一步法。由于血清中細胞因子的含量很低。常規(guī)ELISA法不能滿足要求，需引入生物素－親合素系統(tǒng)來提高靈敏度，即加入樣品后加入生物素標記的另一個抗體，再加入親合素及生物素化的酶，再加入底物進行顯色，顏色與待檢的細胞因子量呈正比。
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