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ELISA酶聯(lián)試劑盒基本原理
發(fā)布時(shí)間： 2021-07-09 點(diǎn)擊次數(shù)： 4445次ELISA酶聯(lián)試劑盒基本原理是什么呢？
ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、酶聯(lián)免疫試劑盒)基本原理是酶分子與抗體或抗抗體分子共價(jià)結(jié)合，此種結(jié)合不會(huì)改變抗體的免疫學(xué)特性，也不會(huì)影響酶的生物學(xué)活性。
此種酶標(biāo)記抗體可與吸附在固相載體上的抗原或抗體發(fā)生特異性結(jié)合。滴加底物溶液后，底物可在酶作用下使其所含的供氫體由無(wú)色的還原型變成有色的氧化型，出現(xiàn)顏色反應(yīng)。
因此，可通過(guò)底物的顏色反應(yīng)來(lái)判定有無(wú)相應(yīng)的免疫反應(yīng)，顏色反應(yīng)的深淺與標(biāo)本中相應(yīng)抗體或抗原的量呈正比。此種顯色反應(yīng)可通過(guò)ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn),酶聯(lián)免疫試劑盒)檢測(cè)儀進(jìn)行定量測(cè)定，這樣就將酶化學(xué)反應(yīng)的敏感性和抗原抗體反應(yīng)的特異性結(jié)合起來(lái)，使ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、酶聯(lián)免疫試劑盒)方法成為一種既特異又敏感的檢測(cè)方法。
一個(gè)完整的ELISA試劑盒都是有以下部分完整組成:(1)已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑);
(2)酶標(biāo)記的抗原或抗體(結(jié)合物);
(3)酶的底物;
(4)陰性對(duì)照品和陽(yáng)性對(duì)照品(定性測(cè)定中)，參考標(biāo)準(zhǔn)品和控制血清(定量測(cè)定中);
(5)結(jié)合物及標(biāo)本的稀釋液;
(6)洗滌液，在板式ELISA中，常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩沖鹽水;
(7)酶反應(yīng)終止液，常用的HRP反應(yīng)終止液為硫酸，其濃度按加量及比色液的終體積而異，在板式ELISA中一般采用3mol/L。
以上內(nèi)容就是ELISA酶聯(lián)試劑盒基本原理了。